操作步骤:
1.成年鼠肝匀浆2000xg(约4000rpm) 离心15分,4℃(6×50ml高速转头)
2.沉淀用1mM NaHCO3 稀释再在4000rpm离心15分,4℃
3.沉淀按湿重1g/ml NaHCO3 稀释后配成68%蔗糖液,置于离心管下部,上部用42%蔗糖液
4.6×50ml高速转头,42200xg(18000rpm),4℃离心90分钟,加速“5”减速“5”
5.离心后,粗制细胞膜在42%与68%蔗糖液之间形成
6.粗制细胞膜吸出后,用1mM NaHCO3 稀释后,再以2000xg(约4000rpm)4℃离心30分,重复二次
7.去除上清液沉淀,再用1mM NaHCO3 稀释,在50ml 离心管中,从底部依次向上铺设:68%蔗糖液(稀释样品配成)、48%蔗糖液、42%蔗糖液。
8.铺好后再次离心,6×50ml高速转头,18000rpm,4℃,90分钟,加速“5”减速“5”
9.离心结束后可以看出细胞膜分布在42%与48%蔗糖液之间
成果:阶梯形蔗糖梯度在50ml 离心管中用高速冷冻离心机分离亚细胞构造(膜、线粒体、溶酶体、高尔基复合体、微体等),由于开发了高强度的组培养管而变得更为可行。
落地式高速冷冻离心机
落地式高速冷冻离心机采用直接驱动,*抽真空,免除换皮带及真空系统维护的麻烦。可对细胞质、病毒菌体、化学物质等进行离心和浓缩,广泛应用于分子生物学、生物化学等高科技领域。
实验室高速离心机
实验室高速离心机是利用旋转转头产生的离心力,使悬浮液或乳浊液中不同密度、不同颗粒大小的物质分离开来,或在分离的同时进行分析的仪器。应用领域广泛,适用于化工、食品、制药、环保、采矿、教学等实验室使用。
面对市场上种类繁多,玲琅满目的离心机,可要选好一台合适自己需求的离心机实属不易。下面盐城安信实验仪器有限公司为大家介绍几种基本的挑选方法:
-/gbafaid/-
主要经营在医学检验中,离心机是常作为分离血清、血浆、沉淀蛋白质或作尿沉渣检查的仪器设备。利用离心机可使混合液中的悬浮微粒快速沉淀,借以分离比重不同的各种物质的成分。。