基因编辑、基因敲除crispr

基因编辑、基因敲除crispr
目前 CRISPR/Cas9技术已成功应用于人类细胞、小鼠、斑马鱼、果蝇、**、水稻及拟南芥等真核生物的基因编辑中，并取得一系列重要的科研成果。近年来，该技术也逐步被用于对微生物的研究中，利用 CRISPR/Cas9系统可对微生物的基因进行敲除、插入、沉默和定向调控等，并通过相关实验推测基因功能。
北京亿鸣复兴生物（）聚焦微生物基因编辑领域，组建微生物研究团队，依托强大的微生物和分子生物学背景，根据不同细菌和真菌的特性，选用不同的编辑策略，已成功在铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌、乳酸菌、芽孢杆菌、白色念珠球菌、酿酒酵母、黑曲霉等十几种细菌及真菌中建立了成熟的CRISPR/cas9基因编辑体系。北京亿鸣复兴生物（）提供从生物信息学分析、基因编辑分子实验、细胞实验、动物模型制作的一站式技术服务，可以实现包括gRNA设计、CRISPR/Cas9载体构建、细胞转染、阳性克隆鉴定、单克隆细胞培养、基因敲除细胞系构建等服务。
细菌CRISPR基因编辑特点
由于细菌中无SOS修复系统，且复制、启动、重组修复元件菌种间差异很大
我司凭借丰富的分子生物学经验，可根据菌种特性，选择合适的启动子、复制子以及重组修复系统，构建载体骨架，目前已实现单质粒、双质粒系统的构建和编辑。
项目优势
已在大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌、肺炎克雷伯杆菌中建立成熟的基因编辑体系
对大多数细菌的生长特性、重组修复机制等较为熟悉，可快速建立相应的基因编辑体系
可实现多基因无痕敲除/转入
丝状真菌编辑策略选择及优劣势
策略一
主要适用于有自主复制子的丝状真菌转化
策略二
主要适用于无自主复制子，需要借助农杆菌进行质粒复制，借由农杆菌实现基因组改造，会留有抗性基因
策略三不借助于质粒系统，但是编辑效率略低
用户可根据不同的菌种及实验要求选择合适的编辑体系，目前我司已在黑曲霉、根霉、毛霉、香菇、稻瘟病以及纹枯病等丝状真菌中成功实现了CRISPR基因编辑。