呼和浩特病原微生物检测机构

广东省华微检测股份有限公司

病原微生物检测在感染判定中意义重大，越来越多的检测技术引入，除了传统的检测方法如涂片染色、培养分离、*学技术、核酸检测等，还有新兴的二代测序技术等。
病原微生物检测——蛋白质指纹图谱技术：
蛋白质指纹图谱技术是随着蛋白质组学兴起的一种新技术，用于各种疾病特蛋白指纹的识别和判断，可以直接检测不经处理的尿液、血液或细胞裂解液等。人体血清里有成千上万个蛋白，人一旦发生了某种疾病，蛋白质成分就必然会起变化。该技术不是利用单独的蛋白质峰的出现和消失来判断SARS，而是用5个蛋白质峰的出现和消失来判断，好比刑侦破案中甄别5个手指的指纹，故此称为“指纹图谱”。质谱仪通过复杂的计算能够记住SARS病人血清里蛋白质的图谱，通过对质谱仪的“训练”之后，它就能够根据人体血清中的特异变化，灵敏地辨别出测试的对象是否感染了SARS病毒。
这种检测方法经过检测，阳性率接近95%，特将近96%，能在病人发烧的天即可以得出满意的检测结果。只需要一滴血，将采集到的病人血样现场直接放到9mol浓度的尿素里，病毒可以*溶解灭活，这样在一般医院的化验室里即可实现安全操作，从而防止交叉感染。有称蛋白质指纹图谱技术标志着一种划时代的诊断模式的诞生。

病原微生物检测——分子生物学与*学相结合的方法：
1、*PCR：
*PCR(immuno polymerase chain reaction，IM PCR)是1992年Sano等[16]建立的一种检测微量抗原的高灵敏度技术。该技术把抗原抗体反应的高特和聚合酶链反应的高敏感性**结合起来，它的基本原理是用一段已知DNA分子标记抗体作为探针，用此探针与待测抗原反应，PCR扩增粘附在抗原抗体复合物上的这段DNA分子，电泳定性，根据特PCR产物的有无，来判断待测抗原是否存在。目前，国内外报道的*PCR的敏感性一般比现行的EL ISA法高102～105倍。由于PCR产物在抗原量未达到饱和前与抗原抗体复合物的量成正比，因此*PCR还可用于抗原的半定量试验。
2、PCR2EL ISA：
PCR2EL ISA法是PCR与EL ISA技术结合的检测方法。其综合了PCR，分子杂交，和EL ISA 3种技术的优点。主要用于检测样品中的特定基因。它引入(或生物素)标记的dN TP或引物进行PCR扩增，利用酶标抗抗体(或酶标记亲和素)进行EL ISA检测，代替了用于常规PCR产物检测的电泳方法，方便快捷，易于处理大量样品，且其灵敏度比使用琼脂糖凝胶电泳检测方法高100倍，当有适当的标准品时，还可进行定量测定。

病原微生物检测——生物芯片：
生物芯片技术是将生物大分子，如寡核苷酸、cDNA、基因组DNA、肽、抗原以及抗体等固定在诸如硅片、玻璃片、塑料片、凝胶和尼龙膜等固相介质上形成生物分子点阵，当待测样品中的生物分子与生物芯片的探针分子发生杂交或相互作用后，利用激光共聚焦显微扫描仪对杂交信号进行检测和分析。根据生物芯片上探针的分子种类而将之分为DNA芯片(即基因芯片)和蛋白质芯片。微生物检测基因芯片是指用来检测样品中是否含有微生物目的核酸片段的芯片。基于高通量、微型化和平行分析的特点，微生物检测基因芯片在微生物病原体检测、种类鉴定、功能基因检测、基因分型、突变检测、基因组监测等研究领域中发挥着越来越重要的作用。

病原微生物检测——分子生物学方法：
分子生物学及分子遗传学的发展，使人们对微生物的认识逐渐从外部结构特征转向内部基因结构特征，微生物的检测也相应的从生化、*方法转向基因水平的检测。
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