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选择层析方法

用分离范围宽广的凝胶过滤介质如Superose， Sephacryl HR依据分子量将样品分成不同组份

用含专一配体或的亲和层析介质结合目标蛋白，离子交换填料价格，一步即可得到高纯度样品;亦可用各种活化偶联介质偶联目标蛋白的底物、受体等自制亲和介质

体积大的样品，离子交换填料多少钱，往往使用离子交换层析来浓缩和粗纯化;高盐洗脱的样品再用疏水层析纯化

疏水层析用高盐吸附，低盐洗脱的原理，离子交换填料，洗脱的样品又可直接上离子交换介质;两种方法常被交替使用

如何选择层析填料

按照层析技术原理分类选择填料：凝胶过滤填料选择、离子交换填料选择、亲和填料选择、疏水填料选择、反相填料选择

层析工艺不同阶段选择填料的一般规律根据目的物的性质选择填料

根据目的物的性质选择填料

根据规模选择合适的层析预装柱层析空柱选择

层析空柱选择

特点:结合了Sephadex的高选择性和琼脂糖的高物理稳定性，机械稳定性好，高分辨率高化学稳定性

层析填料介质

单分散基球替代多分散基球 层析介质粒径大小和粒径分布是影响层析分离的重要参数。粒径分布越均匀，装柱越容易、柱床越稳定、柱效越高、流速越均匀、洗脱越集中、分离效率越高、流动相用量越少，离子交换填料哪家好，柱与柱重复性也越好；Protein A 介质被誉为层析介质皇冠上的明珠，价格昂贵，可是市场上Protein A 介质都是采用粒径分布较宽的基球。主要原因是单分散微球制备技术难度较大，世界上可以规模生产的单分散多孔微球只有Dynal公司一家，GE销售的SOURCE 系列单分散聚l色谱填料就是Dynal生产的。但SOURCE 产品的粒径只有30微米，不能满足Protein A 介质对粒径一般要大于40微米的要求。纳微经过多年的努力开发出世l界领l先的微球制备技术，突破大单分散大粒径多孔微球的制备难题，成为家生产单分散Protein A 亲和层析介质的公司。