外泌体电镜检测-武汉科锐诺生物(图)

武汉科锐诺生物科技有限公司

外泌体分离提取方案。主要方案包括：

1、差速**1速离心法；

适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品；

2、基于PEG沉淀原理的试剂盒法；

适用于血1清、脑脊液等小体积的样品；

3、超滤提取法；

适用于细菌培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配**1速离心法，外泌体电镜检测，做进一步的提取。

外泌体是细胞外囊泡的一种，其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似，电镜下，显示出典型的茶托状**微结构。实际操作中，通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括：透射电镜（形态鉴定）、NTA检测（粒径及浓度鉴定）、WB（分子标志物）。NTA检测作为外泌体鉴定的经典方法之一，可同时反映出检测样品的浓度及粒径。质量较好，纯度较高的外泌体样品，粒径分布在30-150nm，原液浓度在10^9左右。为了保证检测质量，对每一个样品，都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日，可当天到样当天出结果。

实验室采用Zetaview（品牌：Particle Metrix）进行外泌体浓度粒径测试服务。其方法即纳米颗粒跟踪分析（Nanoparticle Tracking Analysis，NTA），原理是对每个颗粒的布朗运动进行追1踪和分析，结合Stockes-Einstein方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。NTA技术已被外泌体研究领域认可为外泌体表征手段之一；相较于其他表征方式，NTA技术的样本处理更简单、更能保证外泌体原始状态、检测速度更快。Zetaview包含的微电泳技术，也可进行zeta电位的检测。

目前配备为488nm波长的激光器，且搭配对应的滤光片，可以测量荧光抗1体标记的外泌体。

外泌体的作用

直接作用:外泌体表面的蛋白分子或脂质配体直接激1活靶1细胞表面的受体，产生信号复合体并激1活胞内信号通路。递送作用:外泌体可以与靶1细胞的质膜融合或内吞直接进入细胞，将自身携带的蛋白质、核酸、脂质等活性分子带到细胞内，进而调控细胞的功能及生物学行为。武汉科锐诺生物科技有限公司   专1业的技术 良好的服务 欢迎来电咨询！

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